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氮吹儀在檢測(cè)三聚氰胺的中的應(yīng)用

更新時(shí)間:2016-08-31 點(diǎn)擊次數(shù):2201

一、使用儀器和試劑:

     液相色譜儀;紫外分光光度計(jì);電子分析天平;超純水機(jī);組織搗碎機(jī);

     漩渦混勻器;超聲波清洗器;高速冷凍離心機(jī);固相萃取儀;氮吹儀

試劑:三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品;乙腈HPLC級(jí);庚烷磺酸鈉;及色譜純或分析純。

 

二、溶液配制

三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液:稱取0.100g(至0.1mg)的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品,用甲醇水溶液(1+1)超聲待溶解后冷卻定容于100ml棕色容量瓶中,該濃度為1.0mg/ml,于4內(nèi)儲(chǔ)存,有效期3個(gè)月。移取該標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用流動(dòng)相逐級(jí)稀釋,配制成一系列濃度的工作溶液。

 

離子對(duì)試劑溶液:準(zhǔn)確稱量2.02g庚烷磺酸鈉和2.10g檸檬酸,加水定容至1000ml容量瓶中,0.45µm水系濾膜抽濾后備用。

 

三、材料

羅非魚、對(duì)蝦。羅非魚去鱗、去皮取背部和腹部肌肉;對(duì)蝦去頭、去殼、去附肢,取肌肉部分。用高速搗碎機(jī)將樣品搗碎后置-18以下保存。實(shí)驗(yàn)時(shí)將樣品自然解凍至室溫。

 

四、樣品前處理方法

1.直接提取處理方法

稱取5g(至0.01g)樣品于50ml離心管內(nèi),準(zhǔn)確加入10ml提取液,渦旋混合均勻1min,振蕩提取20min,靜止2min后,于5000r/min的離心機(jī)上離心10min,取上清液2ml轉(zhuǎn)移至2ml離心管中,于8000r/min的高速離心機(jī)離心8min。取上清液過0.2µm濾膜上機(jī)測(cè)定。

2.過固相萃取柱處理方法

稱取5g(至0.01g)樣品于50ml玻璃比色管內(nèi),準(zhǔn)確加入提取液20ml混勻,超聲20min,冷卻至室溫,取上層提取液9000r/min離心10min,取上清液5ml過預(yù)先經(jīng)3ml甲醇、3ml水活化的HyperSep Retain-CX固相萃取小柱,再依次用3ml水和3ml甲醇洗滌,棄去流出液,至過柱速度不超過1.0ml/min。抽至近干后,以5ml氯水-甲醇溶液(5%)洗脫,收集流出液,于50下水浴氯氣流吹干。向殘留物中準(zhǔn)確加入1.0ml甲醇水(2+8)溶液,渦旋混合1min,過0.2µm有機(jī)濾膜,上機(jī)測(cè)定。

 

五、色譜條件

色譜柱:DIKMA C18(250mm×4.6mm,5µm);

流動(dòng)相:乙腈:離子對(duì)試劑溶液=8+92(體積比);

流速為1.2ml/min;

檢測(cè)波長(zhǎng):236nm;

柱溫:40;

進(jìn)樣量:20µL;

流動(dòng)相使用前過0.45µm濾膜。

以上內(nèi)容摘自黃春麗等注的《水產(chǎn)品中三聚氰胺的快速檢測(cè)方法》。

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